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igvtools是最常用的NGS数据可视化工具之一,功能非常强大,可以展示序列比对,拷贝数变异,突变位点等多种数据的分布,网址如下
https://software.broadinstitute.org/software/igv/home
本文主要介绍如何使用这个工具来展示测序深度的分布,对于测序深度,有多种格式的文件都存储了相应的信息,比如我们之前介绍过的bedgraph, bigwig等。igvtools当然支持直接导入这种格式的文件,但是igvtools官方更推荐使用它们自己制定的一种文件格式-TDF。
TDF格式也是采用了滑动窗口的方式,用窗口内的数据的平均值来代表该窗口的结果,最终生成了一个二进制的文件,这个文件igvtools处理起来更加快速。通过igvtools的命令行工具,可以由bam文件生成对应的tdf格式的文件,用法如下
igvtools count \-z 5 -w 10 -e 0 \sample.bam \sample.tdf \genome.fa
生成了tdf格式的文件之后,就可以导入到igvtool之中,首选选择对应的基因组版本,然后通过File->Load from File导入对应的文件。
为了展示的更加美观,我们对默认参数进行一些调整。通过View->Preferences按钮, 调整Charts的参数,勾选对应的单选框,示意如下
在igvtools中,每一行展示的数据称之为track, 通过右键弹出的菜单,可以对每个track的颜色,数值范围进行调整。调整参数之后,可以生成如下所示的结果
igvtools也支持导出图片,通过File->Save Images可以导出png, svg, jpeg等多种格式的文件。
·end·
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